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技術(shù)文章

病理 | 組織包埋技術(shù)(下)

更新時(shí)間:2022-10-17 瀏覽次數(shù):2799

在上篇文章中介紹了什么是組織包埋以及各種包埋劑的挑選和使用,接下來(lái)帶領(lǐng)大家了解特殊包埋方法以及如何使石蠟包埋取得最佳效果。

 

我們正常的病理標(biāo)本采用石蠟包埋都可以獲得較為滿意的切片,但有些標(biāo)本需要特殊方法才能制作,用普通的包埋方法達(dá)不到要求,比如需要加急的標(biāo)本、又比如體液標(biāo)本,這樣的標(biāo)本就需要有特殊的包埋方法。

 

01  快速石蠟包埋法

主要應(yīng)用于加急標(biāo)本的快速診斷,且組織塊太小或太碎,無(wú)法采用冰凍切片方法制片時(shí),取材要薄。將薄小的組織塊投入40%甲醛10ml、95%乙醇85ml、冰cu酸5ml的混合固定兼脫水液中2分鐘,入純丙酮Ⅰ3分鐘,入純丙酮Ⅱ3分鐘,入苯2分鐘,浸蠟5分鐘,快速包埋組織后進(jìn)行冷卻切片、烤片、脫蠟至水、染色及封固。

 

02  體液石蠟包埋法

對(duì)于體液標(biāo)本,如痰液、胃液、尿液、腹水和胸水等,作病理切片檢查時(shí),也可用石蠟進(jìn)行包埋。

 

如果是痰液,應(yīng)選取痰中含有血液的部分或可疑的實(shí)體部分,包在雙層紗布內(nèi),先以10%中性甲醛固定,再經(jīng)脫水、透明和浸蠟,最后包埋。濁的液體放入離心管中,以2000~3000次/分鐘轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心沉淀15秒。

 

凡是新鮮胃液、尿液、腹水和胸水等液體標(biāo)本,應(yīng)先倒去上面的澄清液體,將下面較為混濁的液體放入離心管中,以2000~3000次/分鐘轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心沉淀5~10分鐘。再倒去上清液,并以10%甲醛固定下面的沉淀物,然后進(jìn)行脫水、透明、浸蠟和包埋。

 

如何使石蠟包埋取得*佳效果

 

我們可以做一些提高石蠟包埋效果的工作,以人為的力量改善石蠟的韌性和黏度:這種方法是在石蠟中加入一些其他物質(zhì)。

 

 

01   蜂蠟

蜂蠟,又叫黃蠟,是蜜蜂用來(lái)造巢的淡黃色蠟,蜂蠟的熔點(diǎn)在54℃左右,質(zhì)地柔軟,滑潤(rùn)有韌性。為了使低熔點(diǎn)的石蠟硬一些,可加入10%~20%的蜂蠟。它能增加蠟的熔點(diǎn)而不必使組織浸在高溫內(nèi),便于切片。同時(shí)也要根據(jù)組織的種類而異,一般常規(guī)用量不超過(guò)5%為度。

 

一般我們?nèi)缜兄?~5μm的切片,56~58℃的石蠟基本達(dá)標(biāo),但如果要切制1~3μm的切片,其韌性和黏度就顯不夠,就會(huì)出現(xiàn)石蠟無(wú)法支撐的現(xiàn)象,因?yàn)楣庥杏捕鹊氖灂?huì)很脆,容易斷裂,如果加入蜂蠟,使其韌性和黏度加強(qiáng),就可以制出更好的切片。

 

02   硬脂酸

如果想加強(qiáng)石蠟的硬度,可以加入硬脂酸、松香等。硬脂酸為有光澤的白色片狀結(jié)晶體,不溶于水,而溶于乙醇,醚和氯f(wàn)ang。熔點(diǎn)64~71℃,在蠟中加入少量的硬脂酸可增加石蠟的滲透性。

 

03   松香

為棕黃色半透明的固體,質(zhì)硬而脆,遇熱熔解,呈膠體狀,同石蠟混合時(shí),可增加石蠟的硬度,由于松香質(zhì)脆,混合后可增加硬度但韌性不足。

 

當(dāng)然使用質(zhì)量好的石蠟,也是重要的,不能為了省錢,而購(gòu)置雜質(zhì)很多的石蠟,切出的片子也好不到哪去。因含雜質(zhì)太多不光影響石蠟對(duì)組織的浸透,而且在切片時(shí),還可因石蠟的雜質(zhì)過(guò)多,含有大的顆粒,而使片子出現(xiàn)劃痕。

 

Leica提供多種石蠟供選擇,其中39601006(Paraplast  Regular石蠟,常用型,顆粒裝,8*1公斤/箱,56℃,脫水/包埋通用)和39601095(Paraplast High Melt石蠟,高熔點(diǎn)型,顆粒裝,8公斤裝,56-58℃,脫水/包埋通用)廣州東銳常備庫(kù)存。

 

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