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技術(shù)文章

如何練就細胞計數(shù)神功?

更新時間：2022-06-09 瀏覽次數(shù)：2336

01 細胞計數(shù)的重要性

對于大多數(shù)需使用細胞系的操作，如轉(zhuǎn)染、細胞融合技術(shù)、冷凍保存和傳代培養(yǎng)等，有必要在操作前對細胞數(shù)進行定量。因為如果接種細胞的密度過高，實驗還沒結(jié)束細胞就會出現(xiàn)接觸抑制，影響細胞狀態(tài)，蛋白的表達也會受到影響；但如果密度過低最后收集到的樣品過少，檢測不到，我們要花額外的時間等待細胞長到合適的密度。

使用相同數(shù)量的細胞將保持最佳生長，并有助于使用細胞培養(yǎng)的程序標準化，這反過來也使結(jié)果具有更好的再現(xiàn)性。所以細胞計數(shù)非常重要，它是一個實驗成功的基礎(chǔ)。

文章開頭提到的血球計數(shù)板是以往細胞計數(shù)常用的方式，它的使用較為耗時，還易受操作者主觀判斷的影響，并且某些細胞類型，如形成簇的細胞類型，難以用這種方法計數(shù)。

02 Scepter™3.0細胞計數(shù)儀

現(xiàn)有的細胞計數(shù)設(shè)備可提供替代的細胞定量方法，這就包括我們的Scepter™3.0細胞計數(shù)儀。

Scepter™3.0細胞計數(shù)儀采用“計數(shù)金標準"庫爾特原理。

Scepter感應(yīng)器吸入精確的樣本體積；
細胞穿過感應(yīng)器小孔時，電阻值增加。電阻值的增加導(dǎo)致電壓的增加；
每個細胞經(jīng)過時引起的電壓的增加作為一個脈沖被記錄下來；
用直徑和細胞數(shù)目繪制直方圖，脈沖的大小代表細胞的大小，脈沖的數(shù)目代表細胞的個數(shù)。

最大的特點是：

計數(shù)精準，提供基于細胞大小的直方圖（如上圖）；
手持式體積小巧；
可以給出細胞體積；
可以進行復(fù)雜的混合型的細胞計數(shù)；
計數(shù)迅速，平均在30秒之內(nèi)完成計數(shù)（最快14秒）。

03 檢測范圍與應(yīng)用

基于細胞直徑以及樣品濃度的感應(yīng)器選擇指南：

樣本濃度范圍（個/毫升）	50,000-1,500,000個/毫升	10,000-500,000個/毫升
直徑范圍(µm)	4-20 µm	6-36 µm
適合測量的顆粒直徑范圍	5-15	8-25
感應(yīng)器規(guī)格	40 µm	60 µm

樣本濃度范圍

（個/毫升）

50,000-1,500,000個/毫升

10,000-500,000個/毫升

直徑范圍(µm)

4-20 µm

6-36 µm

適合測量的顆粒直徑范圍

5-15

8-25

感應(yīng)器規(guī)格

40 µm